pcr所需的有机物

本篇文章给大家分享pcr所需的有机物，以及pcr需要加入的原料对应的知识点，希望对各位有所帮助。

简述信息一览：

• 1、PCR生物实验常用的染料有哪些
• 2、pcr扩增所需要必须的物质有(高考难度)
• 3、有机物会影响pcr酶活性吗
• 4、PCR实验室主要仪器设备和耗材清单
• 5、PCR反应中各种添加剂的作用
• 6、我不懂PCR的意义?生物化学方面的词

PCR生物实验常用的染料有哪些

1、荧光特性：ROX 是一种被广泛应用的无活性荧光参考染料，主要用于校正实时 PCR 仪器中荧光信号的变异。与此同时，Dye2 可能是其他类型的荧光染料，如 FAM、TAMRA、HEX 等，具有不同的荧光特性和应用。

2、分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料。核酸染料主要有EB（溴化乙锭，高致癌性），goldview，sybr green（实时定量PCR时常用染料）。这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到。

3、荧光染料包括饱和荧光染料和非饱和荧光染料，非饱和荧光染料的典型代表就是现在最常用的SYBR GreenⅠ；饱和荧光染料有EvaGreen、LC Green等 SYBR Green I是荧光定量PCR最常用的DNA结合染料，与双链DNA非特异性结合。

4、常用的核酸染料有：EB染料 EB属于核酸分子嵌入剂，通常用于分子遗传学、DNA和染色质结构分析等研究中，特别是国内很多实验室仍在使用EB进行凝胶核酸电泳实验的染色。

5、溴酚蓝，作为指示溶液前沿的。2×Taq PCR MasterMix已经预混了PCR反应体系中试剂以及电泳时所需loading buffer的成分。

pcr扩增所需要必须的物质有(高考难度)

现在你分析原癌基因。所以就是做DNA的PCR。所以相对的。C D G H，就不需要了。

参加PCR反应的物质主要有五种即：引物、酶、dNTP、模板和缓冲液。引物有多种设计方法，由PCR在实验中的目的决定，但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。

pcr需要的原料有：物（PCR引物为DNA片段，细胞内DNA***的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液。

*） 10倍稀释 水 补足所需体积 这是标准的PCR反应体系，PCR反应有五要素：引物（PCR引物为DNA片段，细胞内DNA***的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）。

有机物会影响pcr酶活性吗

1、外因：激活剂，重金属离子，环境离子浓度，主要是钙、钾、钠、乙醇等有机物达到一定浓度会使酶变性失活。

2、底物浓度不能影响酶活性。影响酶活性的因素，一定会影响酶促反应的速率，但影响酶促反应的速率的因素不一定影响酶的活性，这是易忽略点也是易错点。

3、影响PCR 的主要因素 PCR技术必须有人工合成的合理引物和提取的样品DNA，然后才进行自动热循环，最后进行产物鉴定与分析。

4、温度：高温使酶变性失活，不可逆转。低温使酶活性降低，一旦温度提高，酶的活性还会恢复。PH值：过高的PH值和过低的PH值都会使酶变性失活，且都不可逆转。

PCR实验室主要仪器设备和耗材清单

1、金属制品：水龙头、样品匙（药勺）、坩埚铁架台、滴定台、试管架、坩埚钳、酒精喷灯、夹子、镊子、实验剪刀、升降台、本生灯等。

2、摇床又称摇瓶机，它是培养好气性微生物的小型试验设备或作为***扩大培养之用。冰箱 冰箱是实验室中保存试剂和样品必不可少的仪器。

3、一个实验室要能进行PCR反应实验，一般要具备以下实验设备：超净操作台、涡旋振荡器、小容量离心机和PCR仪。由于PCR技术的提高，其对环境的要求也有所降低，所以为了方便，许多人做PCR反应已不在无菌操台上进行了。

4、很干净整洁的实验环境，RNA提取对操作环境的要求很高。2，电动组织分散仪（IKA公司的T10那种）或研钵+液氮或玻璃组织研磨器，以上提取效果递减。3，5ml管冷冻离心机。4，移液枪1ml、200ul、10ul一套，最好专用。

PCR反应中各种添加剂的作用

1、一些共溶剂和添加剂能够降低错误率，提高扩增效率。共溶剂有甲酰胺（25-10%，v/v）、二甲基亚砜（最高可到15%，v/v）及甘油（1%-10%，v/v）。添加剂包括氯化四甲铵、谷氨酸钾、硫酸铵。

2、BUFFER 作用主要是稳定PCR过程中的PH。用于PCR的标准级冲液的主要成分，其中二价镁离子的存在与否至关重要。镁离子浓度可直接关系DNA聚合敌的活性和DNA双链的解链温度，因此对反应的特异性及产证有显著影响。

3、促进核酸骨架的形成。Mgcl2和硫酸镁在pcr的作用主要是促进核酸骨架的形成，影响聚合酶的4活性。Mgcl2浓度过高会降低扩增特异性，浓度过低影响扩增产量。

我不懂PCR的意义?生物化学方面的词

1、PCR（Polymerase Chain Reaction）是聚合酶链反应，是用来扩增DNA片段的，需要dNTP、引物、模板DNA、Taq DNA聚合酶以及Mg2+等，95度高温变性，50度左右退火，72度适温延伸，循环这三步，将DNA链进行扩增。

2、聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA***，PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。

3、PCR可能是分子生物学中使用最广泛的技术。这种技术被用于生物医学研究，犯罪取证和分子考古学。

4、聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction），简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA***。

5、使在PCR过程中扩增出的目的片段在得率上提高、特异性增强、浓度上提高等，说白了就是是最终产物的纯度增加，以便提高后续实验的成功率。纯化是将多糖混合物分离为单一多糖的过程。

6、PCR的最终产物，虽然有大小不同的片段存在，但完整目的基因占绝对优势，可通过电泳后分离获得。

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